AREA DE BIOLOGÍA MOLECULAR

LABORATORIO DEL HOSPITAL EL CRUCE

ÁREA DE BIOLOGÍA MOLECULAR

INICIO: El laboratorio comienza una nueva etapa con la incorporación de determinaciones de laboratorio por PCR REAL TIME. Debido a la necesidad de un hospital de alta complejidad de métodos diagnósticos más sensibles y específicos las prestaciones de inicio están dirigidas al diagnóstico de infecciones sistémicas y del Sistema Nervioso Central.

Menú Prestacional

• Herpes Virus Simplex (HSV) : La realización de PCR en LCR posee una sensibilidad del 98-100 %. La utilización de este método es primordial para el diagnóstico de formas graves de enfermedad herpética como encefalitis y herpes neonatal.
  
• Citomegalovirus (CMV): es la técnica más ampliamente utilizada en la detección de CMV. Se puede aplicar a una gran variedad de muestras como LCR, líquido amniótico, orina y sangre de neonatos y humor acuosos o vítreos de pacientes VIH con retinitis.
• Virus Varicela Zoster (VZV)
• Virus Epstein Barr
• Virus JC/BK
• Enterovirus
  
• Toxoplasma gondii
• Mycobacterium tuberculosis. Mycobacterias atípicas.
• Detección de microorganismos  meticilino-resistentes (MRS)
• Detección de microorganismos vancomicina-resistentes (VRS)

INFECCIONES RESPIRATORIAS VIRALES AGUDAS

• Diagnóstico de Influenza A H1N1 en muestras respiratorias por PCR real time.
  

ÁREA DE CITOGENÉTICA EN EL LABORATORIO DE ALTA COMPLEJIDAD

CITOGENÉTICA CLÍNICA

Es la rama de la genética médica que tiene por objeto el estudio de la estructura y el comportamiento cromosómico y su relación con la patología genética.

ESTUDIO CITOGENÉTICO

INDICACIONES:

1. PERÍODO PRENATAL:

- Embarazada mayor de 35 años

- Triple screening alterado

- Retraso de crecimiento intrauterino (CIR)

- Anomalía ecográfica

- Antecedentes de cromosomopatía balanceada en un progenitor

2. PERÍODO NEONATAL:

- Malformaciones/ Defectos congénitos

- Rasgos dismórficos

- Genitales ambiguos

- Muerte neonatal de causa inexplicada

3. PERÍODO LACTANCIA/ESCOLAR:

- Dificultades para el aprendizaje

- Rasgos dismórficos

- Retraso psicomotor

4. PERÍODO DE ADOLESCENCIA:

- Ginecomastia

- Falta de desarrollo puberal

- Amenorrea primaria o secundaria

5. PERÍODO DEL ADULTO:

- Padres de niños con anomalías cromosómicas estructurales

- Abortos de repetición

- Infertilidad inexplicable

6. EN TODAS LAS EDADES:

- Procesos malignos (cariotipo constitucional y tumoral)

- Control de trasplantes de medula ósea

 

ANOMALÍAS CROMOSÓMICAS

Estructurales

•Inversiones

•Inserciones

•Duplicaciones

•Deleciones

•Cromosomas marcadores

•Anillos

•Isocromosomas

•Translocaciones

Numéricas

•Poliploidías

•Aneuploidía
 

Se encuentran anomalías cromosómicas en aproximadamente 30 de 10000 nacimientos, mientras que los desórdenes del sistema nervioso (como defectos del tubo neural) se expresan en 20 de 10000 nacimientos

CARIOTIPO: DEFINICIÓN

“IDENTIFICACION Y ORDENAMIENTO SISTEMÁTICO DE LOS CROMOSOMAS DE UNA CÉLULA DE ACUERDO A CONVENCIONES INTERNACIONALES”

DIAGNÓSTICO PRENATAL CITOGENÉTICO
 
Principio

• El cariotipo constitucional de un individuo es determinado en la concepción.

• Las mitosis sucesivas darán lugar a copias del complemento cromosómico en todas las células que posteriormente originarán los distintos tejidos derivados.

• Se incluye tanto al tejido fetal propiamente dicho como a los tejidos extraembrionarios (córion, amnios, saco vitelino, etc.)

Biopsia de Vellosidades Coriales





 
CULTIVO DE LINFOCITOS

1.Toma de muestra
2.Cultivo: medio de cultivo+SFB+PHA
3.72 hs. 37ºC
4.Colchicina Centrifugación
5.Shock hipotónico. Centrifugación
6.Fijación: AcH:MeOH 3:1
7.Preparación de extendidos
8.Coloración
9.Técnicas de bandeo
10.Análisis al microscopio óptico

SISTEMA DE TRANSPORTE NEUMÁTICO EN HOSPITALES

• 
  
  P     personal reducido
• R     racionalización  
• O     organización 
• D     día y noche
• U     útil 
• C     cómodo y limpio 
• T     tiempo ahorrado 
• I      ideal por bajo costo
• V     valioso 
• O     operativo y experimentado

Personal reducido: Evita largos tiempos de caminata del personal. No requiere reemplazos en casos de urgencia.

Racionalización: No ocupa tiempo de personal calificado y evita estrés en los profesionales (*TAT que percibe el médico es distinto al tiempo real)

Organización: se adapta a cualquier cambio en la organización, se pueden añadir o cambiar trayectos.

Día y noche: puede ser usado las 24 horas.

Útil: Trae alivio a la tarea asistencial, ahorra tiempos de espera en los resultados.

Cómodo y limpio: bioseguridad.

Tiempo ahorrado: velocidad de 6 mts/seg o sea 22 km/hora. (La cápsula no se detiene, el personal sí puede ser interrumpido en su camino)

*TAT: Turn around time

• Ideal por su bajo costo: corto tiempo de amortización.
• Valioso: por la confiabilidad y manejo sencillo
• Operativo y experimentado: usado en instituciones de todo el mundo.

Complejidad: Se mide por el número de estaciones y no por su longitud.

Ejemplos:

  

• Nuevo Hospital Madariaga de Posadas, Misiones: 21 estaciones.

  

• Hospital El Cruce: 18 estaciones

• Hospital San Martín de La Plata: 6 estaciones.

• Hospital Fernández: 6 estaciones.

• Hospital de Clínicas: 2 estaciones.

  

• El HEC es el único establecimiento donde el laboratorio se conecta con todas las áreas del Hospital.

• Todas las muestras, excepto la orina de 24 horas pueden ser enviadas.

• Se aceleran los procesos de urgencia.

• Las muestras deben enviarse tapadas correctamente, ya que el derrame de material biológico inutiliza la cápsula mientras se desinfecta.

• El laboratorio posee una alarma de aviso que ha llegado una muestra-

 Monitor de Control

 

Estación de laboratorio

ORGANIZACIÓN DEL LABORATORIO

Area de Microbiología

Sector Bacteriología

Sector Parasitología

Sector Micología

Sector Virología

Inmunofluorescencia

Biología Molecular

Aparatología:

Bactec Instrument (Becton Dickinson Argentina S.R.L.): Automatización de hemocultivos.

Microscopio de Inmunofluorescencia.

PCR real time.

Area de Hematología 

Sector Hemostasia

Aparatología: ELITE PRO (WMArgentina SA)

Sector Hematología (contador hematológico)-Metabolismo delHierro. Electroforesis de Hemoglobina. Citometría de Flujo. Inmunohematología. Biología Molecular. Enfermedad mínima residual. Translocaciones. Enfermedades genéticas.

Aparatología: CELL DYN 3700 (ABBOTT Laboratories)

COBAS e-411 (Productos ROCHE)

AXSYM PLUS (ABBOTT Laboratories)

BT 3000 PLUS (WIENER lab)

SPIFE 3000 (BIOARS)

Area de Química Clínica

Determinaciones en Autoanalizador para Química Clínica: sustratos metabólicos-Enzimología- Perfiles lipídicos- Marcadores cardíacos-Perfil hepático-Función renal.

Determinaciones turbidimétricas. Determinaciones manuales: ASTO-PCR-FR

Aparatología: BT 3000 PLUS (WIENER lab) 

Area de Serología (Serología 1, 2 y 3)

Serología 1.1

Determinaciones inmunoturbidimétricas

Aparatología: HITACHI 902 (Propiedad de ROCHE)

Serología 1.2

Endocrinología-Marcadores tumorales-Marcadores de resorción ósea-Marcadores cardíacos.

Hormonas: Eje Tiroideo-Eje Adrenal-Eje hipofisis-hipotalámico.

Marcadores de Resorción Osea: Beta crosslaps,osteocalcina, PTH molécula intacta, Vitamina D3)

Marcadores cardíacos: Troponina T, Mioglobina

Aparatología:

COBAS e-411 (Productos ROCHE)

AXSYM PLUS (ABBOTT)

Serología 1.3

Inmunoserología: Marcadores de Hepatitis- VIH- Rubeolla- CMV

FERRITINA-Hormonas-BNP-Drogas terapéuticas)

Técnicas manuales: Confirmaciones por Western-blot-MHTP

Aparatología: AXSYM PLUS (ABBOTT)

ARQUITECT 1000 (ABBOTT

Serología 2

Proteínas plasmáticas: Electroforesis- Inmunoelectroforesis-Inmunofijación-Determinaciónh cuantitativa por nefelometría de Inmunoglobulinas y demás fracciones proteicas. Lipidogramas

Aparatología: SPIFE 3000 (BIOARS)

Serología 3

Enfermedades autoinmunes- TORCH- Pruebas de Avidez-Enfermedades tropicales ( Chagas, dengue), HTLV I y II- Hidatidosis-Rotavirus-Adenovirus Autoinmunidad: ANA- ASMA- AMA- Hepatitis autoinmune-ENA. Técnicas de ELISA e IF)

Aparatología: BRIO (BIOARS SA)

Microscopio de Inmunofluorescencia.

Area de Medio Interno-Sector de Guardia de Laboratorio

Gases en sangre

Determinación de Sodio, Potasio, Cloro, Calcio iónico, Magnesio iónico en sangre-orina.

Glucosa-Lactato.

Cooximetría.

Química Clínica-Hemostasia-Hematología. Marcadores Cardíacos. Líquidos de punción. Determinaciones de urgencia.

Osmolaridad plasmática y urinaria.

Aparatología: BT 3000 (Propiedad de WIENER lab)

AXSYM PLUS (ABBOTT lab)

COBAS e-411 (Propiedad de Productos ROCHE)

Coagulómetro (WMArgentina)

Analizador Nova Biomedical modelos Stat Profile CCX y Stat Profile pHOx (S.I.P.L.A)

Analizador de Iones RAPIDCHEM (Siemens)

Contador hematológico MICROS 60 (WMArgentina)

MiniVidas (Biomerieux)

Area Orinas-Coprología-Parasitología

REQUISITOS PARA EL FUNCIONAMIENTO DEL LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS Y EJERCICIO DE LA PROFESIÓN BIOQUÍMICA

1. Habilitación: El director técnico debe estar registrado en la Dirección de Fiscalización Sanitaria del Ministerio de Salud de la Provincia de Buenos Aires.

2. Decreto 3280/90: establece los requisitos para obtener la habilitación.


3. Colegio de Bioquímicos de la Provincia de Buenos Aires: tiene incumbencia en la habilitación del laboratorio y en el ejercicio de la profesión.

Ley 8271: Texto actualizado con las modificaciones introducidas por los Decretos-Leyes 9384/79 y 9947/83 y Leyes 11925 y 13560. Ejercicio profesional de la bioquímica en la Provincia de Buenos Aires. Art. 8 establece : ARTICULO 8.- (Texto según Ley 11925) A los efectos que determina el artículo 1° de la presente Ley, se considerará "BIOQUÍMICO" al profesional universitario cuyo diploma consignare, en singular o plural, las palabras "BIOQUÍMICO" o "BIOQUÍMICA", aunque éstas llevaren algunas otras precedentes y/o siguientes y/o cualquier aditamento. Dicho diploma deberá estar expedido o revalidado por Universidad Nacional o por Universidad Privada legalmente autorizada a ese fin.

4. Ley 13560: modifica la Ley 8271: ampliación de los alcances de la profesión bioquímica.


5. Código de ética profesional.


6. Demás leyes y decretos reglamentarios: www.colebioqpba.org.ar




Acreditación de laboratorios de análisis clínicos:


• PAL : programa de acreditación de laboratorios de la Fundación Bioquímica Argentina, con invitación del director del programa a participar en el estudio de la norma ISO 15189:2003 "Medical laboratories - Particular requirements for quality and competence" (Laboratorios clínicos. Requisitos particulares para la calidad y competencia).


Certificación:


• NORMAS ISO 9000:2005


• NORMAS ISO 9001:2008


• NORMAS ISO 9004:2000

La norma ISO 15189 está específicamente dirigida a la acreditación de diferentes tipos de laboratorios clínicos. La ISO 15189 es también apropiada para las fases preanalítica y postanalítica. El conjunto del texto incluye dos apartados importantes: sobre el sistema de gestión de la calidad, equivalente a los requisitos para la certificación, y sobre los requisitos técnicos adicionales necesarios para la acreditación. Los anexos sobre la protección del sistema de información del laboratorio y la ética, proporcionan una información muy útil. Cualquier laboratorio que busque el reconocimiento de su competencia por vía de la acreditación, encontrará muy útil esta norma internacional. El proceso supondrá un trabajo considerable sobre el sistema de gestión, rutinas, documentación y procedimientos. El proceso también requerirá que el personal esté motivado y apoye el sistema de gestión.

INICIO DEL LABORATORIO: PLANIFICACIÓN

LABORATORIO DE ALTA COMPLEJIDAD DE UN HOSPITAL EN RED

• Conocer y evaluar las necesidades del entorno, quienes serán nuestros clientes externos e internos.
• Una vez definido el perfil del Hospital acordar el menú prestacional con los especialistas y evaluar qué pacientes se atenderán en el mismo.
  
  Por ejemplo:
  Pediatría: Qué patologías?,infecciosas? Neurológicas? Oncohematología? Etc.
  Clínica Médica: Hematología? Reumatología? Enfermedades autoinmunes?
  Infectología: PVVS? Consultorio Externo?
  Terapia Intensiva: Qué pacientes admite?

Esto sería lo ideal pero con algunos servicios es muy difícil de lograr y en muchas oportunidades queda librado al conocimiento de los profesionales del laboratorio elaborar una cartilla prestacional acorde con las necesidades.

Recordar:
Si no es un Hospital Especializado, hay que planificar cuidadosamente las determinaciones a ofrecer y considerar la replanificación de sectores del laboratorio a medida que se incorporen servicios en el Hospital.
Pediatría: considerar que no es especializado en Pediatría DEFINIR
Cardiología: considerar que no es especializado en Cardiología DEFINIR

¿El HOSPITAL VA A SER DE AGUDOS, CRÓNICOS O AMBOS? Tener definido este punto aclara totalmente el camino a seguir. Si el Hospital interna pacientes con patologías crónicas el laboratorio tendría que crecer e incorporar tecnología continuamente, o de lo contrario derivar muestras a otros centros y entonces ya no sería de alta complejidad.

La misión de organizar un laboratorio de alta complejidad desde el día cero, en un hospital nuevo, con un modelo de atención no comparable con otro Hospital conocido representa un desafío desde el punto de vista económico y organizacional.
Desde el punto de vista económico:
Calcular los insumos de los probables “clientes internos y externos” pero con aparatología de alta complejidad con un amplio menú prestacional.
Insumos caros, determinaciones poco usuales, para las cuales los pacientes antes de la apertura del Hospital debían trasladarse a otras ciudades para atenderse.
El hecho de ser un Hospital de derivación y con una pobre demanda de los consultorios externos del propio hospital, las determinaciones se encarecen en los comienzos.
Se debe montar una estructura con guardia de laboratorio ante la apertura de internación. Las terapias intensivas reciben pacientes complejos, incluso derivados de otras UTI, lo cual obliga a alta tecnología en aparatos de gases en sangre, ionogramas que incluyan la determinación de calcio y magnesio iónico, marcadores cardíacos, marcadores de malnutrición, indicadores de sepsis, automatización de hemocultivos, para dar rápida respuesta a los servicios de internación.
Establecer normativas para la solicitud de material descartable, el uso del mismo, la correcta extracción de muestras clínicas, requiere muchas horas de capacitación del recurso humano.

Estrategias de prevención de Infecciones intrahospitalarias: Cultivos de vigilancia.
Recurso Humano especializado/capacitado en áreas del laboratorio muy específicas para el perfil del hospital. Por ejemplo:

Si el Hospital va a desarrollar un Servicio de Cirugía Cardiovascular el laboratorio debe tener

· Área de hematología con hemostasia de alta complejidad.
· Determinaciones de marcadores cardíacos y/o predictores de recuperación post-cirugía.
· Guardias con personal entrenado en hospitales con alta complejidad.
· Área de Microbiología con rápida respuesta.

LABORATORIO DE ANÁLISIS CLÍNICOS Y MICROBIOLÓGICOS

Inicio

Como organizar la apertura de un laboratorio de alta
complejidad en un nuevo hospital: Experiencia en un Hospital de
Alta complejidad que trabaja en red.

Tips a tener en cuenta:

Contar con los planos para tener las medidas exactas del laboratorios, ya que de ello dependerá la aparatología (Por el tamaño hay ciertos equipos que ya pueden ser descartados)

Los laboratorios de los hospitales a inaugurar generalmente tienen un equipamiento “llave en mano” que corresponde a un laboratorio mínimo, de baja complejidad, con lo cual lo primero es hacer un estudio de situación y elaborar un listado con la aparatología necesaria.

Si en el listado del equipamiento llave en mano hubiera aparatología que consideramos no necesaria, intentar un canje con los proveedores pero antes que la misma sea entregada, ya que de otra manera es difícil, casi imposible. En caso que el canje no fuera posible, siempre aceptar lo ofrecido, porque s puede ser útil en un futuro para nosotros u otro hospital de menor complejidad.

La modalidad de realizar licitaciones de reactivos con aparatología en comodato es la solución ideal para los laboratorios públicos ya que se asegura el servicio técnico todo el año, incluido los feriados, lo cual está presupuestado e incluido en el precio total. También permite el cambio de aparatos por mejor tecnología o en caso de aumentar el número de determinaciones previstas, sin tener que gestionar compras de nuevos equipos.

Conocer quiénes serán nuestros clientes externos e internos y cuáles son sus expectativas.

Conocer las patologías prevalentes en el Área de influencia de nuestro Hospital, ya que aunque ciertas especialidades no se atiendan, el laboratorio puede aceptar derivaciones de otras instituciones de salud y centralizar prestaciones de alta complejidad.

Lo más importante es, de acuerdo con los líderes del proyecto, establecer la misión, visión y la planificación inicial del Servicio.